(1)取材料,加液氮研磨成粉末狀,迅速移入1.5 ml Eppendorf管中;
(2)加入800 μl的CTAB提取緩沖液,混勻(CTAB在65℃水浴預(yù)熱),每5min輕輕震蕩幾次,20min后12000 r/min,離心15 min;
(3)小心吸取上清液,加入等體積的酚:氯仿(各400μl)溶液,混勻,4℃,12000 r/min,離心10 min;
(4)小心吸取上清液,加入等體積的氯仿,混勻,4℃,12000 r/min,離心10 min;
(5)重復(fù)步驟(4)1-2次,以蛋白層不出現(xiàn)為止;
(6)取上清,-20℃沉淀1h,4℃,12000 r/min,離心10 min;
(7)棄去上清液,用70%乙醇洗滌沉淀2次;
(8)室溫下干燥后(一般干燥5-15 min),溶于30-50 μl DEPC去離子水中,于-20℃或者-70℃下保存?zhèn)溆谩?/p>